【北京艾德莱】无毒,不用蛋白酶K消化中量大量血液基因组DNA提取
【北京艾德莱】无毒,不用蛋白酶K消化中量大量血液基因组DNA提取
背景:
全血中提取DNA是一项古老又基本的分子生物学的工作,根据不同的下游的实验和分析,历史上使用方法种类非常多,传统酚氯仿抽提法,高盐盐析法,硅胶模离心柱吸附法,磁珠法,等等。各种方法都有自己的优点和缺点。不同的方法适合不同的下游实验需求。一直以来血样,尤其是病例血样的采集是一个很繁琐和高成本的问题。随着时代的发展,各种成本更是急剧上升,准确、清晰的采集血样的成本急剧上升的后果是研究工作者非常迫切需要一种试剂盒,可以一次性的尽可能的将采集到的最大血样量(1-10ml)的DNA全部提取出来,进行长期保存,满足长期、反复、多种研究的需要。
常见解决方案的缺点:
传统方法:对于范围在1-10ml的血样的DNA提取,传统的方法,用SDS,蛋白酶k消化,再用酚氯仿,反复抽提,此过程不但用到了有毒害的苯酚,氯仿,而且特别繁琐,费时间,耗费大量人力物力,并且接触毒害物质在当今社会已经越来越显得不可行。
离心柱方案和磁珠方案:
商品化的离心柱型分离方法或者磁珠分离方案,因为一次处理量太大,要满足中量、大量血液DNA提取的磁珠或者离心柱型的解决方案,在成本上非常昂贵,有的更要求昂贵的工作站成本。一般的科研单位院所也无法承受。
溶液型解决方案的优点和缺点:
另外一种商品化解决方案是的Puregene流程应用经改良的高盐沉淀法纯化DNA,无需蛋白酶K消化,并且确保手工操作时间最小化。流程提供方便的实验终止点,可暂时保存部分纯化的样品,安全可靠。该解决方案以Qiagen,Promega,Roche等进口公司为代表。该方法不需要复杂的实验设备,也不用有毒的苯酚,氯仿,和昂贵的蛋白酶K消化,操作也非常快捷简单。但是由于很多国外公司一般的定价策略是追求暴利,价格也非常昂贵,甚至价格远高于美国和西欧市场的价格。因此国内无法制造的情况下,即使是很简单的技术,国内科研工作者只能购买昂贵的国外试剂,宝贵的科研经费就这样浪费在很基础的血样收集提取阶段了。
详细可参见公司网站。