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涂片法涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、花药等。涂片时应注意:(1)载玻片必须清洁。(2)载玻片要持平。(3)涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右,用解剖刀刃或牙签等涂匀。(4)涂层要薄。用另一载玻片作推片,沿滴有涂抹液的载玻片面(二载玻片夹角应为30°~45°)由右向左轻轻推动,涂成均匀一薄层。(5)固定。如需固定可用化学固定剂或干燥法(细菌)固定。(6)染色。细菌用亚蓝,血液用瑞氏染液。染色液要盖住全部涂面。(7)冲洗。用吸水纸吸干或烤干。(8)封片。长期保存用加拿大的树胶片片。
玻片标本的制作:
浸蜡
组织透明后,在熔化的石蜡内浸渍的过程称为浸蜡。用其他浸透剂(如火棉胶、明胶等)渗入组织内部的过程可称为浸透或透入。浸蜡温度过高(超过 60℃),在蜡内加入二甲苯蜡或由于透明时带进的二甲苯过多,都会导致组织发硬,还会使组织内的抗原受到破坏;所以作者主张浸蜡用的石蜡熔点在56℃(三道),头一道:石蜡30 分钟;第二道:石蜡90 分钟;第三道:石蜡,90 分钟。浸蜡温度控制在56~58℃左右。(头一道也可用硬脂酸石蜡1:3混合浸蜡,昆虫玻片标本,不仅可软化组织,特别适用于比较韧、硬的组织,而且由于硬脂酸是弱酸性的,教学玻片标本,对细胞核有媒染作用,核浆比鲜明,但容易脱片;
时对疏松组织容易散片)。有条件的可以每天打开头一道石蜡的盖子,绍兴玻片标本,让二甲苯挥发。浸蜡所用的石蜡如有杂质尽可能过滤,以防附在组织上,造成切片刀刀口受损,或切片破碎和划痕增多。
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